E3Switch DE3 Manual do Utilizador Página 31

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Radioaktive Lösungen
200 µM [γ−
35
S] GTP-Lösung
Aqua bidest. ad 200 µl
4 µl 10 µM unmarkiertes GTP (final: 200 µM)
1 µl [γ−
35
S] GTP-Stammlösung
200 µM [γ−
32
P]GTP-Lösung
Aqua bidest. ad 200 µl
4 µl 10 µM unmarkiertes GTP (final: 200 µM)
1-10 µl [γ−
32
P]GTP-Stammlösung
I.6 Enzyme
Gewebstransglutaminase
aus Meerschweinchenleber (Sigma-Aldrich Chemie GmbH, Deisenhofen)
Pfu-Polymerase (Stratagene GmbH, Heidelberg)
Dpn1 (New England Biolabs GmbH, Schwalbach)
Thrombin (Sigma-Aldrich Chemie GmbH, Deisenhofen)
I.7 Antikörper
RhoA(26C4), monoklonaler Maus IgG Santa Cruz (Heidelberg)
Peroxidase-konjugierter Zweitantikörper Biotrend (Köln)
I.8 Verbrauchsmaterialien
Glutathion-Sepharose
TM
4B Beads (Amersham Pharmacia Biotech, Freiburg)
Benzamidin-Sepharose
TM
6B Beads (Amersham Pharmacia Biotech, Freiburg)
Monodansylcadaverin (Sigma-Aldrich Chemie GmbH, Deisenhofen)
Protran Nitrocellulose Transfer
Membrane (Schleicher & Schuell, Bioscience, Dassel)
Polyvinylidendifluorid-Membran (Pierce, USA)
„Complete“ Proteaseinhibitor (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim)
“High Flash-point LSC-cocktail” (Perkin Elmer, Boston)
Quarzwolle, 5-30 µm (Roth GmbH & Co, Karlsruhe)
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